���Ŵ�ѧ+CRISPR�����ù������ƻ�����༭[���¼���]

�����壺 �� �� С �� ʱ�䣺2016��04��06�� ��Դ������ͨ

�༭�Ƽ���

������Ϊ������ͷ�������ǣ����Ŵ�ѧ��optogenetics����CRISPR��������������ײ�����ʲô���Ļ𻨣�2015�꣬��ѧ�ҽ��CRISPR�͹��Ŵ�ѧ���������������ֹ⼤���CRISPR���ߡ���Щ�������о���Ա�ܹ����ù���ⲿ���ƻ�����༭���̵ĵص㡢ʱ���Ϳ����ԡ�

��Ϊ������ͷ�������ǣ����Ŵ�ѧ��optogenetics����CRISPR��������������ײ�����ʲô���Ļ𻨣�2015�꣬��ѧ�ҽ��CRISPR�͹��Ŵ�ѧ���������������ֹ⼤���CRISPR���ߡ���Щ�������о���Ա�ܹ����ù���ⲿ���ƻ�����༭���̵ĵص㡢ʱ���Ϳ����ԡ�

��ʱ���Ͽ���ת¼

����Ĺ⼤��CRISPRϵͳ��2015�������������������ù�������ת¼������������ʵ���ң�������ѧ��Moritoshi Satoʵ���ҺͶſ˴�ѧ��Charles Gersbachʵ���ң����ڹ��յ�����Դ����������ɫ��2��CRY2���������ؽ�ϵ���1��CIB1�������������Ƶ�ϵͳ�����ǵ�Ŀ�������ù�������͹رջ���ı�ͬʱ����ʱ�տ��ƺͿ����ԡ�

Nihongaki���˿�������ϵͳ���������ںϵ�����ɵģ�1) ������ê���� �C ʧ���Cas9���ף�dCas9����CIB1�ںϣ�2) ������ �C CRY2���Ѻ�øͬԴ����CRY2PHR����ת¼������VP64��p65���ںϡ�һ����ϸ���б���gRNAָ���£�dCas9-CIB1��Ŀ��DNA���н�ϣ���CRY2PHR-����������Ư����������������£�CRY2��CIB1���ۻ�������������������ת¼��

�о���Ա�����˶���������Ż��ںϵ��ס����Ƿ��֣�������õ������NLS-dCas9-trCIB1��NLSx3-CRYPHR-p65�������⣨470nm���������²�������ģʽ���о���Ա���֣���ASC1����ı��ɱ��ռ���ơ����ǻ����Ͽ���͹ر����⣬����ASC1�ı��Ҳ��������˵�����Ƶ�ȷ�ǿ����ҿ��ظ��ġ�

Polstein���˿����Ĺ⼤��CRISPR/Cas9ЧӦ�LACE��ϵͳҲ���������ƵIJ��ԣ����������˲�ͬ���ںϵ�����ϡ������Ż���LACEϵͳ������1) CIBN-dCas9-CIBN������CIBN��CIB1��N��Ƭ�Σ���dCas9��N�˺�C���ںϣ�2) CRY2FL-VP64��ȫ����CRY2��ת¼������VP64�ںϡ���HEK293Tϸ�������ô�ϵͳ���յ���IL1RN�ı��о���Ա����2Сʱ��mRNAˮƽ���11����30Сʱ�����400������ϵͳҲ��֤���ǿ���ĺͿ��ظ��ġ�


���Ļ���������

֮��Satoʵ�������Ƴ��˹�ϵͳ���и�Ŀ��DNA���У���������˫�����ѣ�DSB����ͨ����ͬԴĩ�����ӣ�NHEJ����ͬԴ�����޸���HDR�����޸������ϵͳ�Ķ���֮��������������һ�֡����ѵġ�����ø�����߽�Cas9�ֳ�N�ˣ�2-713���л���N713����C�ˣ�714-1368���л���C714�������߽�ÿ��Cas9Ƭ����һ�����ۻ��Ľṹ�����ںϣ������˹���Cas9���ߡ�

�������߳����˼��ֲ�ͬ�Ĺ���ƣ���������ɹ�������������˴��Թ�ص��ף���Դ������й���Vivid�������ϵͳ���dz�ΪpaCas9-1�������ںϵ���N713-pMag��nMagHigh1-C714����ʾ���ͱ����͸ߵ��յ����ԡ���ȫ����Cas9��ȣ�paCas9-1ʶ����ͬ��PAM�����������ƵĶ�λ�����ԡ�������ļ����£�paCas9-1��ͨ��NHEJ�յ�����ȱʧ��Ƶ��Ϊ20.5%������ͨ��HDR�յ����Σ�Ƶ��Ϊ7.2%����

���߻������������ܹ�ͨ���޸�paCas9-1������ϵͳ�ı������ԡ�������nMagC714��ȡ��nMagHigh1-C714��������paCas9-2�����ָı䲢δ���Ըı�ϵͳ����ͻ���Ч�ʣ��������˱���DSB��������֮ǰ�Ĺ���һ����Satoʵ���һ�����paCas9-2�����ڿռ��Ͽ��ƣ���ͨ�����⿪�������漤�

���������������ģ�Nihongaki����֤�����滻�ں����е�Cas9�ṹ��Ҳ�������ɹ����п�ø�������dCas9�������б�����Ļ��Զ��ǿ����ҿ��ظ��ġ�

��סCRISPR

���⣬Alexander Deiters��ʵ�����������һ�ֲ�ͬ�ķ���������CRISPR�����������Ŵ�����Ĺ��֣�photocaging����������Cas9�����ϲ�����һ���ɹ�ȥ���ı������ţ�Ҳ������������ס�������ᣨPCK����Ϊ����Cas9���ض�λ�����PCK���о�С��ʹ��������������tRNA�ϳ�ø���ڵ���������ֹ������ʱ����PCK��

�о���Ա���ȼ�������סCas9���ĸ��������ܹ��õ��׵��и��������õ�ʧ�������K866�����ᡣȻ����������˫�������ӫ���⣬֤��Cas9 K866PCKͻ�����ȷʧ���������⣨365nm�����������ʾ����Ұ����Cas9ͬ�����и���ԡ�����о���Ա֤�������ֹ���Cas9ϵͳ�ܹ�����Դ�Ļ������Ĭ��

����������뼤����ƻ��޸Ļ�������߶��й��ߣ�ͨ���������ƻ�����༭������CRISPR�͹��Ŵ�ѧ�ķ�չ�������ڴ�δ��������������Ӧ�á�������ͨ ���ɣ�

����˵����
0  ������    0 �˴β���
��¼ ע������
��������ˢ��
�鿴�������� > >

��������ͨ��Ѷ

���Ŀ�Ѷ��

��������

��ʱ����

��չ��Ϣ

��ע���ĺ�/����������Ѷ

����ͨ��ҳ | ���ն�̬ | ����ͨ�̳� | �˲��г� | ���Ŀ��� | �ؼ�ר�� | ����������

��Ȩ���� ����ͨ

Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

��ϵ���䣺

��ICP��09063491��