��CRISPR����������߻������°빦����[��Ʒ�Ƽ�]

�����壺 �� �� С �� ʱ�䣺2016��04��15�� ��Դ����������

�༭�Ƽ���

����CRISPR-Cas9������ȡ����ǰ20 bp��sgRNA���������һ�����Ѱ�ЧӦ�����Կ�չCRISPR�о�����Ҫ�ϳ��൱������sgRNAs��������ô�ͳ��ʽ�ϳɴ���sgRNAs�������ϳɷ��øߣ����Һϳ�Ч�ʵ͡�������Ա���辭�ø�Ч�Ĵ��ģ�ϳɹѺ����������Ŀ�ķ������������Ǹ������ؿ�չCRISPR������

CRISPR�ı���Ϸ����ļ���

1987�꣬һ���ձ��о�С�����о��󳦸˾�ʱ������K12��������ø���и����гɴصĶ̼���ظ����С���ʱ�о���Ա���������Щ���е�����ѧ���塣

Ȼ������ʮ���Ľ��죬��������۵ġ�С���֡�ȴ���ų���ҫ�۹�â����Ϊ��ѧ���������������СƬ���ҵ���һ�ֿ��ԶԶ�������Ļ���������Ŵ�����Ĺ��ߣ��ر���ǣ����ַ������������dz��ؼ򵥡���������ʵ�õĻ���������¼�����ΪCRISPR-Casϵͳ��


 
ͼ1 CRISPRԭ��

�ɴصĹ��ɼ��Ķ̻����ظ����У�Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat sequences������CRISPR���У�������ձ���ѧ�ҵ��귢�ֵ��Ǹ����С��о����֣���ЩCRISPR������ܶಡ������������DNA�����ǻ����ģ�˵������CRISPR-Casϵͳ���п�����������������������������ߵ�һ�������Է������ƣ��ͺ���������һ����Ӧ�����߷�Ӧϵͳ��

��2013����CRISPR������о��ʱ���ʽ���������ǿ�ʼ��CRISPRӦ���ڸ��������繹���ض�ͻ������ģʽ�����ijЩ�Ŵ����²�ͻ��������Σ�������������ȵ�Car-T�����ȡ�CRISPR-Cas9��ĿǰӦ�����Ļ���༭ϵͳ֮һ������ϵͳ������һ��Cas9���׺�һ��20 bp��single guide RNA��sgRNA����sgRNA����ʶ��Ŀ�����У�Cas9ָ��ǰ��crRNA��CRISPR RNAs���ij��졢��ԴDNA������������⡣crRNAͨ����������trans-activating RNA��tracrRNA������γ�tracrRNA/crRNA������˸�������������øCas9��������crRNA��Ե����а�λ�����˫��DNA�����DNA˫�����ѣ���������ϸ���޸����ƣ�����ȱʧ��InDel������ķ�ͬԴĩ�����ӣ�non-homologous end joining����ͬԴ���飨homologous recombination���޸����ơ�

CRISPR-Cas9������ȡ����ǰ20 bp��sgRNA���������һ�����Ѱ�ЧӦ�����Կ�չCRISPR�о�����Ҫ�ϳ��൱������sgRNAs��������ô�ͳ��ʽ�ϳɴ���sgRNAs�������ϳɷ��øߣ����Һϳ�Ч�ʵ͡�������Ա���辭�ø�Ч�Ĵ��ģ�ϳɹѺ����������Ŀ�ķ������������Ǹ������ؿ�չCRISPR������

OligoMix®Ϊ���ģ�Ѻ������Ŀ�ϳɶ���
 

������ϯ��ѧ�Ҹ���������������������������ó����ģ�ϳɼ�����ԭλ�ϳɻ���оƬ�����������˹�����ϳɸ���Ŀ�ѧ�ҡ����ڴ˸��2004�����������������ѧGeorge Church�����Ĺ⻯ѧԭλ�ϳɻ���оƬ���п��ٺϳ��л��ԵĻ�����о��ɹ��ѷ����ڹ��ʶ����ڿ���Nature���ϡ�

OligoMix®��Ϊ�����о���Աʹ�û�ϹѺ����ᣨpooled oligonucleotides�����ж��ֲ�ͬӦ�ö��з��IJ�Ʒ������������������֪ʶ��Ȩ��µParaflo®΢����оƬƽ̨������һ����ƽ�еغϳ���ǧ����ͬ������ɵĹѺ����ᣬ�Ѻ�����ϳɲ��ñ�׼��DMT��ѧ������֤�˹Ѻ�����ĸ߲����͸��������ݲ��㣬OligoMix®���Աȴ�ͳ����ϳɼ�����ʡ�˽�20����֧����ʱ�䡣

����Oligomix®���ѱ��о���Ա�ɹ�Ӧ���ڻ���ϳɣ��Ŀ⹹������ҩ���֣��Լ����򲶻�̽���Ʊ������Ӧ������


OligoMix®�ɹ�����CRISPR��Guide RNAs

��CRISPR-Cas9ͻ��ɸѡ�У��о���Ա��Ҫ���ܹ������ǧ���������λ���guide RNAs��¡�����������У�Ȼ��Ͷ�ݡ�������ϸ���С�ͨ������guide RNAs���趨����ϸ���еĸ���������о���Ա�ܹ�ϵͳ�����ٵؼ������ض�������صĻ���Ϊ��ʹ���ģɸѡ�����Ϊ���ܣ�����Ҫ���ģ�ϳ�guide RNAs��

OligoMix®��Ϊ��Щϣ�����ģ�ϳ�guide RNAs�Ŀ���о���Ա�ṩ��һ�׶�һ�޶��Ľ���������о���Ա���Կ��ٺϳɰ�����ǧ����ȫ���ƻ��������Ŀ⣬��Щ�����Ե����Ѻ��������п�ʶ����������ض�������

����ټ���OligoMix®��ΪCRISPR Guide RNAs�ijɹ�Ӧ�ð���

Nat Biotechnol (2016) High throughput mapping of regulatory DNA.��IF=41.514��


 
ͼ2 MERAʵ�鷽��

����MIT��Giffordʵ���ң���Brigham and Women��s Hospital���о���Ա֤ʵ��OligoMix®�ϳɵ�guide RNAs�Ŀ���MERA�����о߱���Ч�ԡ�MERA����ȫ����Multiplexed Editing Regulatory Assay��������CRISPR-Cas9�Ķ��ػ���༭����ʵ���ɸѡ������

Genome Res (2016) A new class of temporarily phenotypic enhancers identified by CRISPR/Cas9-mediated genetic screening.��IF=14.630��


 
ͼ3 ����˳ʽ����Ԫ���ĸ�ͨ��CRISPR/Cas9�鵼ɸѡ����

Ludwig Institute for Cancer Research�α������Ŷ���Oligomix®��ΪGuide RNAs���ɹ�������һ�ֻ���CRISPR/Cas9������༭�ĸ�ͨ��ɸѡ�����������ڹ�����ɸѡ����������е�˳ʽ����Ԫ�����о��Ŷӽ���һ��������������̥��ϸ����POU5F1�����ϣ�������ʾ��һЩ�����˳ʽ����Ԫ����������һ��dz���ĵ���Ԫ������Щ�dz���ĵ���Ԫ���ܹ���һ�����벻���ķ�ʽ����ת¼���ء�

Methods Enzymol (2014) Adapting CRISPR/Cas9 for functional genomics screens.


 
ͼ4 sgRNA�Ŀ�ϳ�����ɸѡ����

McGill University�о���Ա֤ʵ���Ѻ�����⣨Oligomix®����¡����ת¼����������壬��ͬʱ����Cas9����ø��sgRNAs�����ַ���Ϊ��ͨ�����ܻ�����ɸѡ�ṩ���ȶ��Ϳ��ظ��Ա��Ļ���༭���ߡ�

����OligoMix®��CRISPR-Cas9�е�ǰ��Ӧ�õ�����ʵ�֣�

�����
1.Gao X, Church, GM, et al. (2004) Accurate multiplex gene synthesis from programmable DNA chips. Nature 432,1050-1054.
2.Rajagopal N, Srinivasan S, Kooshesh K, Guo Y, Edwards MD, Banerjee B, Syed T, Emons BJ, Gifford DK, Sherwood RI (2016) High throughput mapping of regulatory DNA. Nat Biotechnol 34(2):167-74.
3.Diao Y, Li B, Meng Z, Jung I, Lee AY, Dixon J, Maliskova L, Guan KL, Shen Y, Ren B.(2016) A new class of temporarily phenotypic enhancers identified by CRISPR/Cas9-mediated genetic screening. Genome Res 26(3):397-405.
4.Malina A, Katigbak A, Cencic R, Maïga RI, Robert F, Miura H, Pelletier J. (2014) Adapting CRISPR/Cas9 for functional genomics screens. Methods Enzymol546:193-213.

��������ΪCRISPR�о���Ա�ṩ���ģ���Լ۱�Guide RNA�Ŀ�ϳɷ���

��ȡ�����û��о����������ע����΢�Ź��ںŻ򲦴�0571-87662413��


 
������������
�������������2006�꣬��������Ŀ��ٷ�չ���ѳ�Ϊҵ�����ȵĶ���ѧ���������̡���˾ӵ�о�������֪ʶ��Ȩ��µParaflo®΢���嶨�ƻ�оƬƽ̨������Ϊ�����û��ṩ�ӻ����飬ת¼�飬��������ĸ�ͨ�����ƻ������оƬ���������������ȫ���׼��ṩmicroRNA�����оƬ�����ķ����̡���Ϊ���������ṩ��ͨ������������Ĺ�˾֮һ����������ӵ�о���ḻ�ļ����ŶӺ�һ����������Ϣѧר���飬����Ϊ�о���Ա�ṩ����ѧ����������ȸ��Ի����ݷ������������Ϊ�����о���Ա����ѧ��ͨ���о��������������ѽ��������鶨���������뼼�������ߣ�Ϊ�û��ṩ�ᴩ���ķ����ȫ�̽������������������������һֱ����ڵĿ����Ŷӱ����ų��ڽ��ܵĺ���������������Ա�����ҽѧ����ũ������Ŀ�ѧ���֡�ȫ������û�ʹ��������������ʿ��з���͸�������ѧʵ�������ѷ�������600ƪ��ˮƽ�о����ģ���������Cell��Nature��Scienceϵ�ж����ڿ��Ϸ�������22ƪ��

����˵����
0  ������    0 �˴β���
��¼ ע������
��������ˢ��
�鿴�������� > >

��������ͨ��Ѷ

���Ŀ�Ѷ��

��������

��ʱ����

��չ��Ϣ

��ע���ĺ�/����������Ѷ

����ͨ��ҳ | ���ն�̬ | ����ͨ�̳� | �˲��г� | ���Ŀ��� | �ؼ�ר�� | ����������

��Ȩ���� ����ͨ

Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

��ϵ���䣺

��ICP��09063491��